細胞復甦的操作步驟
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細胞復甦,生物學的一種術語,是指將凍存在液氮或者-70℃冰箱中的細胞解凍之後重新培養,細胞恢復生長的過程。操作步驟如下:
1、實驗員戴上防護眼鏡開啟液氮罐,將冷凍管從液氮中取出,迅速投入37℃水浴融化,在水浴中時用鑷子夾住細胞凍存管並在水浴中不時晃動。
2、細胞融化後,在1分鐘內將冷凍管移出。
3、拿酒精棉球擦拭冷凍管外部殺菌消毒,晾乾後放置在水浴上。
4、開啟瓶蓋後把細胞轉入含有4mL培養基的培養瓶中,然後把培養瓶移至培養箱,36℃~38℃培養1小時,讓細胞貼壁。
5、細胞貼壁後,小心移棄培養基,加5mL新鮮培養基,在36℃~38℃中培養。
6、細胞培養24小時後,更換新鮮培養基,繼續培養直到形成單層。
7、詳細記錄復甦細胞的名稱、數量、復甦時間、存放部位等。細胞復甦全程注意無菌操作。
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